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熔蜡仪在组织脱水浸蜡实验中的使用方法

点击次数:3463 更新时间:2018-03-14

熔蜡仪在组织脱水浸蜡实验中的使用方法

 

    组织经过透明剂的*透明后,被移放于使用熔蜡仪熔化后的65左右的石蜡中,于65的电热恒温箱中浸渍的过程称为浸蜡。组织在脱水时,组织中的脂类和类脂等物质在脱水剂的作用下被溶解掉,留下了许多腔隙,许多管腔组织和血管,也有许多腔隙,这些都严重地影响了切片。组织浸蜡时,由于诱导剂(二甲苯)的作用,石蜡进入到组织的各个角落,并在各个角落中保存下来。当石蜡包埋后冷却时,这浸入到里面的石蜡便可起到支撑的作用,而且使组织不致于变形,塌陷等现象,使切片能完整的切出,便于镜下观察。

 

    由于生物样品各种组织成分不同,因此性质也各异,如软硬程度,疏松、致密程度,面积大小等都不相同,自然状态下要将它们切成十几微米甚至几个微米的薄片,几乎是办不到的。包埋(embedding)就是将某些特殊的支持物质浸入到组织块内部,利用支持物质的物理特性,如由液态转变成固态,使整个组织具有均匀一致的固态结构和足够的硬度,以利于用切片机制取极薄的切片。利用石蜡(paraffin)作为包埋剂,将浸过蜡的组织块置于石蜡内制成蜡块,是组织学切片技术中zui常用的一种包埋方法。

 

    使用常规技术制作切片或超薄切片时,由于组织是柔软的,或局部的软硬不均,这样制作厚薄均匀的切片是困难的。所以有必要用一定物质浸透组织内部,整个组织一样硬化,先将熔化的石蜡注入包埋托内(模具),而后用镊子将经过浸蜡的组织块从脱水盒中取出,放入包埋托中央,放在小冷台上,用镊子轻按组织块,以达到组织块平整,盖上脱水盒底,再加好石蜡,移至冷冻台上,待冷冻好后,卸下组织蜡块待切。

    熔化石蜡时使用熔蜡仪操作更加方便,在熔蜡仪桶内放置蜡块前应先关闭电源,固态蜡块要切成小块后放入,建议切成<50×50×50mm块状,过大的蜡块会损坏桶内的保护网罩。根据放入石蜡的软硬,设定恰当的温度,石蜡有软蜡和硬蜡之分,软蜡的熔点有4552~54。硬蜡的熔有56~5858~6060~62使用过程中应随时观察,当桶内的蜡液低过桶体的1/3时,要及时加蜡。加热使用时温度波动会比较大,这属正常现象,当一段时间温度恒定后即可正常使用。英格尔熔蜡仪在运行过程中应不定时的进行搅拌,可以提高精度均匀性。